Penelitian digestasi anaerobik dua-tahap lumpur IPAL biologi industri kertas dengan modifikasi aplikasi enzim dan perlakuan suhu (mesofilik-termofilik) telah dilakukan pada tahap asidifikasi. Percobaan yang dilakukan secara batch ditentukan efektifitasnya melalui perlakuan waktu retensi (2-12 hari) dan jumlah inokulum (150-450 mL/L.) Hasil penelitian menunjukkan bahwa aplikasi protease pada penambahan 0 25 unit/g. TS lumpur pada suhu termofilik dapat meningkatkan hidrolisis yang ditunjukkan dengan peningkatan kadar protein larut mencapai 380% sedangkan dalam proses asidifikasi dapat meningkatkan pembentukan asam organik melalui peningkatan kadar VFA.